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        抗原修復(fù)鍋的使用方法

         更新時間:2018-09-25 點擊量:3520

        抗原修復(fù)鍋Antigen Retriever

            
        免疫組織化學(xué)方法成功與否關(guān)鍵在于抗原決定簇的保存和暴露.組織經(jīng)甲醛固定.甲醛的醛基與

        抗原蛋白的氨基交聯(lián),使決定簇的構(gòu)像改變.從而影響檢測蛋白表達.要充分暴露抗原決定簇,通

        常用到抗原修復(fù)鍋。強適于甲醛固定的組織,經(jīng)石蠟包

        埋后進行免疫染色前的處理,配合特別的抗原修復(fù)緩沖液確保你得到搞質(zhì)量的免疫染色效

        果。

        · 一次可以在6中不同緩沖液中運行,進行抗原暴露

        · 僅暴露抗原決定簇,不損傷組織的形態(tài)

        · 實驗結(jié)果穩(wěn)定,結(jié)果重現(xiàn)性高

        · 系列的玻片在獨立環(huán)境中經(jīng)過處理

        抗原修復(fù)鍋怎樣工作?

            看上去,抗原修復(fù)鍋似我們烹飪的高壓鍋。這是一款功能*的“高壓鍋,主要用于抗原暴露

        的工作,主要的工作原理也是裝玻片的幾個分室可以達到高溫(>120°C)高壓。靈敏的傳感控制

        器來保持一定的溫度和壓力及一定的時間,這些工作參數(shù)都是經(jīng)過嚴(yán)格的科學(xué)實驗得到的數(shù)

        據(jù)。當(dāng)達到需要的溫度,抗原修復(fù)鍋會在該溫度下保持幾分鐘,之后鍋內(nèi)玻片被冷卻2個多小

        時,特殊設(shè)材質(zhì)的內(nèi)鍋體控制了鍋和玻片的冷卻速度。 

        誰是受益人?

            研究病理的實驗室,那里需要高質(zhì)量染色照片(用來發(fā)表)的

            缺乏技術(shù)人員的實驗室,學(xué)生和博士后均可以處理玻片進行組織染色,且不需要很多時間來摸索

            小型病理實驗室,每天處理的玻片數(shù)量有限

        怎樣選擇一種緩沖液(Buffer

            如果你已經(jīng)知道哪種緩沖液用在微波的某種組織抗原修復(fù),那么用抗原修復(fù)鍋時,這種緩沖

        液也同時適用的機會很大。我們提供四種即用型緩沖液R-Buffer A/B/C/U,同時也提供同種更加

        溫和的組織處理緩沖液,我們稱之G系列,R-Buffer AG/BG/CG/UG

            
        選擇Buffer,主要考慮以下兩點:


        1.  抗原的自然特性以及所選擇的抗體


        抗原自身特性和抗原的位置都是首要考慮。我們建議你剛開始的時候選擇抗原表達環(huán)境的

        適Buffer。以下是經(jīng)驗供大家參考:

        Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-r

        elated) R: Buffer A (or AG).

        Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)

        Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)

        Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)

        Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)

        Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)

        2.  固定液以及固定程度

        建議的組織切片的抗原修復(fù)處理是一種針對普通的適化狀態(tài)切片。如果用來切片的組織塊沒有

        充分固定,或者過固定(留在福爾馬林溶液中時間過長),或者用了其它的固定液,那么,處

        理組織切片的流程方案需要重新修訂,便利的辦法是選擇使用G系列緩沖液。對于過固定的

        材料一般推薦用U buffer,或者在同一Buffer里面增加循環(huán)

         

        抗原修復(fù)鍋技術(shù)參數(shù):

        Heigh

        335 mm

        Capacity

        9 litres

        Max. Instrument length

        228 mm

        Width.

        340 mm

        Net Weight

        4.5 kilos

        Internal chamber Dimensions (d/h)

        210/230 mm

        Max. Load Weight

        3.0kg

        Max. Single Fault Temperature

        133.3°C


        使用抗原修復(fù)鍋進行染色的效果示例


        1.福爾馬林固定,石蠟包埋,人乙狀結(jié)腸組織切片,經(jīng)抗原修復(fù)鍋進行抗原暴露,R-

        Buffer C (pH 6.0),組織玻片降溫過夜,抗體MIB-1,抗原Ki-67,R-Detect HRP系統(tǒng)染色

         

        2. .福爾馬林固定,石蠟包埋,人乙狀結(jié)腸組織切片,經(jīng)抗原修復(fù)鍋進行抗原暴露,R-

        Buffer A (pH 8.1),組織玻片降溫過夜,抗體#4B11,抗原CD8 (cell membrane)R-

        Detect HRP系統(tǒng)染色.

        儀器及配件的選購:

        貨號

        產(chǎn)品名稱

        規(guī)格

        62700-20

        Retriever 220 volt (內(nèi)含3chamber

        1

        62705-01

        Slide Chamber

        3/pk

        62705-02

        Chamber Rack

        1

        62705-03

        Lifting Device

        1

        62705-05

        Cord Set (Europe)

        1

        緩沖液的選購:

        貨號

        產(chǎn)品名稱

        規(guī)格

        62706-10

        R-Buffer A (10x)

        250 ml

        62706-11

        R-Buffer B (10x)

        250 ml

        62706-12

        R-Buffer C (10x)

        250 ml

        62706-13

        R-Buffer U (10x)

        250 ml

        62707-10

        R-Buffer AG (2x)

        250 ml

        62707-11

        R-Buffer BG (2x)

        250 ml

        62707-12

        R-Buffer CG (2x)

        250 ml

        62707-13

        R-Buffer UG (2x)

        250 ml

         

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